PCR实验时该如何选择合适的耗材呢？本篇教你

　　关于PCR实验有哪些影响因素呢?我们一般想到的可能是获取的DNA/RNA质量、反转录的效率、引物的特异性乃至DNA聚合酶的保真度、扩增长度等问题，但很少有人会想到耗材的选择，可能也会影响您的实验结果。
 

　　银杏(学名：Ginkgo biloba L.)为银杏科、银杏属落叶乔木。因其已存在数万年之久，也被称为生物界的“活化石”。
 

　　关于其基因组的测序和信息分析，早在两年前就由华大基因、浙江大学和中国科学院的科学家团队共同合作完成。后续功能的验证主要包括PCR检测、ChIP、IP、IHC、IF、FISH等手段。而其中就简单的方式就是PCR验证，那关于PCR实验有哪些影响因素呢?
 

　　我们一般想到的可能是获取的DNA/RNA质量、反转录的效率、引物的特异性乃至DNA聚合酶的保真度、扩增长度等问题，但很少有人会想到耗材的选择，可能也会影响您的实验结果。那么关于PCR实验耗材我们改如何选择呢?
 

　　首先需要明确的是我们做的是哪种PCR实验。根据检测方法的不同，PCR实验分为普通PCR法和荧光定量PCR法，前者一般是终点PCR跑胶法测定，所以在选择耗材时需要关注的主要是耗材本身的导热性和密封性;而后者是实时检测荧光信号，除了导热性和密封性外，对透光性和避光性也有所要求。换句话而言，可以做荧光定量PCR的耗材一定可以来做普通PCR，反之，效果却会差很多!
 

　　确定好了实验类型，我们就可以选择耗材了，如前面所述，我们知道了密封性、导热性、透光性、避光性等因素是我们需要关注的，那为什么要关注这些呢?
 

　　一、密封性
 

　　密封性越好，产物的挥发越少，得到的产物就越多同时气溶胶的产生也越少，对于下一轮实验的污染也就越少，也就意味着假阳性的产生率越低。
 

　　二、导热性
 

　　导热性越好越均一，PCR的速度就越快，准确度也越高。
 

　　三、透光性
 

　　这主要是对于荧光定量而言，我们知道它是一种实时定量的方式，那么耗材本身的透光性就直接关系到我们检测到的荧光信号多少，如果选择耗材透光性不足，本该检测到的信号检测不到，那就会造成我们对结果的误判。
 

　　四、避光性
 

　　这也是针对荧光定量而言的，同上面的因素，如果我们在整个实验过程中没注意避光，带有荧光的试剂过度被消耗，那最直接就会影响我们实验的扩增效率，导致不准确的结果产生。
 

　　基因有限公司提供的GENEPLASTIX系列实验室耗材全线产品均是在十万级净化车间注射成型及装配，除了确保无DNase、无RNase、无热源外，在密封性、导热性、透光性、避光性等方面都在市面上表现比较优异。