本篇教你如何正确的贴PCR封板膜

　　PCR封板膜是一种使用了凝胶的透明封板薄膜，广泛应用于与96/384孔板配合的实验中，比如：PCR、qPCR、ELISA、细胞培养、长期储存、自动化工作站处理等几乎所有的实验都会用到。它起的主要作用是确保封板膜与96/384孔板亲密贴合，以防液体蒸发。
 

　　想必经常做这些实验的宝宝们都遇到过翘边、蒸发、撕不开等各种各样的问题，本来就很难扩增的产物，结果蒸发了一半!心如死灰。
 

　　工欲善其事必先利其器，好不容易摸索好了实验条件，买了好用不变性的PCR板，高透明度的封板膜了，我们还需要掌握好正确的贴膜姿势!
 

　　正确的贴膜方法如下：
 

　　从自封袋中取出单张封板膜或封板铝箔，然后重新封好自封袋，以保持其中的无酶环境。
 

　　1、保持底衬面朝上，握住封板膜或封板铝箔。
 

　　2、在底衬的切线处向下折末端标签。
 

　　3、如果使用的产品为单端标签的封板膜或铝箔，则将衬纸部分除去，然后将封板膜或铝箔锚固到板上，使其密封在整个板上，然后继续除去衬纸。这种方法可以消除封板膜或铝箔产生的卷曲和回滚。
 

　　4、如果使用带有两个末端标签的产品，请以连续平滑的方式剥离中心衬纸。缓慢剥离内衬可以大程度地减少卷曲。注意不要接触薄膜的粘合表面。
 

　　5、用双手抓住两端白色部分，将膜片降低到孔板上。
 

　　6、使用压膜板缓慢刮压封板膜或铝箔，使其密封到板上。此步骤应至少水平和垂直执行两次。施加足够的力对于获得良好的密封性至关重要。
 

　　7、将压膜板沿着孔板的所有外边缘刮压至少两次，确保施加坚定而持续的压力。
 

　　8、密封后检查平板，以确认薄膜/箔片与板之间是否紧密结合。封板膜或铝箔不应出现褶皱，如果观察到皱纹，则说明板未正确密封。同时还要注意，封板膜或铝箔不应向上延伸到板的侧壁上。对于边缘凸起的平板，由于封板膜或铝箔在板上的定位不正确，或者未撕去两端的接头，可能会发生这种情况。确认每个孔周围的粘贴痕迹，平板的整个表面(包括周边)都被密封。
 

　　9、将封板膜或铝箔正确密封到板上之后，沿切线撕下两端白色的接头部分。(效果如下图所示)
 

　　10、最好在开始PCR实验前之前将密封的平板放置至少10分钟，封板膜的粘合力将随着时间增加。
 

　　11、将板转移到PCR仪上，运行PCR仪。