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本篇教你如何正确的贴PCR封板膜

发布时间: 2022-09-26  点击次数: 114次
  PCR封板膜是一种使用了凝胶的透明封板薄膜,广泛应用于与96/384孔板配合的实验中,比如:PCR、qPCR、ELISA、细胞培养、长期储存、自动化工作站处理等几乎所有的实验都会用到。它起的主要作用是确保封板膜与96/384孔板亲密贴合,以防液体蒸发。
 
  想必经常做这些实验的宝宝们都遇到过翘边、蒸发、撕不开等各种各样的问题,本来就很难扩增的产物,结果蒸发了一半!心如死灰。
 
  工欲善其事必先利其器,好不容易摸索好了实验条件,买了好用不变性的PCR板,高透明度的封板膜了,我们还需要掌握好正确的贴膜姿势!
 
  正确的贴膜方法如下:
 
  从自封袋中取出单张封板膜或封板铝箔,然后重新封好自封袋,以保持其中的无酶环境。
 
  1、保持底衬面朝上,握住封板膜或封板铝箔。
 
  2、在底衬的切线处向下折末端标签。
 
  3、如果使用的产品为单端标签的封板膜或铝箔,则将衬纸部分除去,然后将封板膜或铝箔锚固到板上,使其密封在整个板上,然后继续除去衬纸。这种方法可以消除封板膜或铝箔产生的卷曲和回滚。
 
  4、如果使用带有两个末端标签的产品,请以连续平滑的方式剥离中心衬纸。缓慢剥离内衬可以大程度地减少卷曲。注意不要接触薄膜的粘合表面。
 
  5、用双手抓住两端白色部分,将膜片降低到孔板上。
 
  6、使用压膜板缓慢刮压封板膜或铝箔,使其密封到板上。此步骤应至少水平和垂直执行两次。施加足够的力对于获得良好的密封性至关重要。
 
  7、将压膜板沿着孔板的所有外边缘刮压至少两次,确保施加坚定而持续的压力。
 
  8、密封后检查平板,以确认薄膜/箔片与板之间是否紧密结合。封板膜或铝箔不应出现褶皱,如果观察到皱纹,则说明板未正确密封。同时还要注意,封板膜或铝箔不应向上延伸到板的侧壁上。对于边缘凸起的平板,由于封板膜或铝箔在板上的定位不正确,或者未撕去两端的接头,可能会发生这种情况。确认每个孔周围的粘贴痕迹,平板的整个表面(包括周边)都被密封。
 
  9、将封板膜或铝箔正确密封到板上之后,沿切线撕下两端白色的接头部分。(效果如下图所示)
 
  10、最好在开始PCR实验前之前将密封的平板放置至少10分钟,封板膜的粘合力将随着时间增加。
 
  11、将板转移到PCR仪上,运行PCR仪。
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