提到PCR,必然会想到PCR封板膜。别看只是一张小小的PCR封板膜,但对于PCR实验结果却非常重要。小编今天就带大家看看如何选择合适的封板膜。
PCR(聚合酶链式反应)作为生物分子实验常规实验技术之一,已经广泛普及。提到PCR,必然会想到PCR封板膜。别看只是一张小小的PCR封板膜,但对于PCR实验结果却非常重要。小编今天就带大家看看如何选择合适的封板膜。
PCR/qPCR封板膜背景
根据PCR检测信号的原理,可将其分为普通PCR和荧光定量PCR(qPCR)。根据其通量大小,则会用到不同通量的管子/板子(如:单检测管、八联检测管、高通量的96/384孔PCR板等)。
就单管和八联管而言,不论是终点检测的PCR还是实时检测的qPCR,我们均需选择管子导热好且均一、管盖和管体密封性好的产品。对于需要使用高通量的96/384孔板,一般只需要满足导热均匀且传热性好,高温加热不变形等要求;而封板膜则需要根据是普通PCR还是qPCR来选择。
PCR/qPCR封板膜选择指南
有时候很容易将PCR和qPCR的封板膜弄混,进而使得qPCR的结果不好,浪费样品、时间及费用等。
就普通封板膜而言,材质大多是是聚丙烯,无RNase/DNase及核酸,封板容易,不易卷曲,耐受适合的温度即可。
相对普通PCR封板膜而言,由于很多qPCR仪的光路检测通道都位于上方,这就使得其对于封板膜的透光度要求更高;其次要求自身荧光背景;此外,蒸发率低、密闭性好等因素也是很重要的。任何因素的变化,都有可能影实验结果,使得结果不理想。
因此,在寻找PCR或者qPCR封板膜时,需要基于以上因素选择。